Tris-HCl緩沖液的配制方法

Tris-Hcl中文全稱三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽，別稱Tris鹽酸鹽，英文名TRIS hydrochloride。相信許多人對(duì)Tris都不陌生，Tris的應(yīng)用非常廣泛，Tris緩沖液不僅被用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑，還有許多重要用途。

Tris被用于不同pH條件下的蛋白質(zhì)晶體生長(zhǎng)。Tris緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)可用于線蟲核纖層蛋白的中間纖維的形成。Tris也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一，其在電泳緩沖液中與構(gòu)成緩沖體系，穩(wěn)定電泳過(guò)程中的pH。此外，Tris還是制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物的中間物。Tris也被用作滴定標(biāo)準(zhǔn)物。 作為蛋白緩沖液時(shí)，若后續(xù)工作需要質(zhì)譜，則不適宜用Tris，盡量換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液。

而Tris-HCl是由Tris作為主要原料反應(yīng)得來(lái)的，其溶液呈酸性，主要用作生物緩沖液，來(lái)調(diào)整病毒保存液的pH值。如果需要調(diào)整至中性或者堿性，可以添加Tris或者NaOH來(lái)實(shí)現(xiàn)。除開(kāi)這些信息外，Tris-Hcl的配置方法有哪些？你知道多少？下文將介紹Tris-Hcl的配置方法。

Tris-HCl緩沖液的配制方法：

1、Tris-Hcl（0.05mol/L，25℃）

使50ml 0.1mol/L三羥甲基氨基甲烷（Tris）溶液與x ml 0.1mol/L 鹽酸混勻后，加水稀釋至100ml

PH                 x/ml                PH                x/ml

7.1                 45.7                8.1                26.2

7.2                 44.7                8.2                22.9          

7.3                 43.4                8.3                19.9             

7.4                 42.0                8.4                17.2                

7.5                 40.3                8.5                14.7              

7.6                 38.5                8.6                12.4                 

7.7                 36.6                8.7                10.3             

7.8                 34.5                8.8                 8.5             

7.9                 32.0                8.9                 7.0                

Tris分子量=121.14：0.1mol/L溶液為12.114g/L。Tris溶液可從空氣中吸收二氧化碳，使用時(shí)應(yīng)將瓶蓋蓋嚴(yán)。配置不同濃度和不同PH值Tris-Hcl溶液時(shí)，可以先配成一定PH值的0.05mol/L溶液，再稀釋到所需濃度。

2、1M Tris-Hcl（PH7.4、PH7.6、PH8.0）

組份濃度1M Tris-Hcl

配置量 1L

配置方法：

一、稱量121.1g Tris置于1 L燒杯中；

二、加入約800ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙猓?/p>

三、按下面數(shù)值加入濃HCL量調(diào)節(jié)所需要的PH值；

PH值          濃HCL

7.4            約70ml

7.6            約60ml           

8.0            約42ml

四、將溶液定容至1L；

五、高溫高壓滅菌后，室溫保存。

Tris-HCl緩沖液的配制方法