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瘦素(LEP) Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)

點(diǎn)擊次數(shù):2964     更新時(shí)間:2017-10-17

瘦素(LEP) Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)

瘦素(Leptin,LP)是一種由脂肪組織分泌的蛋白質(zhì)類激素。人們之前普遍認(rèn)為它進(jìn)入血液循環(huán)后會(huì)參與糖、脂肪及能量代謝的調(diào)節(jié),促使機(jī)體減少攝食,增加能量釋放,抑制脂肪細(xì)胞的合成,進(jìn)而使體重減輕。

主要由白色脂肪組織產(chǎn)生。其前體由167個(gè)氨基酸殘基組成,N末端有21個(gè)氨基酸殘基信號(hào)肽,該前體的信號(hào)肽在血液中被切掉而成為146氨基酸,分子量為16KD,形成Leptin。Leptin具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng),其中較重要的是作用于下丘腦的代謝調(diào)節(jié)中樞,發(fā)揮抑制食欲,減少能量攝取,增加能量消耗,抑制脂肪合成的作用。

研究表明編碼基因ob,缺失ob基因的大鼠,食欲旺盛,體重顯著增加,導(dǎo)致病態(tài)肥胖。它在身體的濃度使腦部知道現(xiàn)時(shí)身體上的脂肪數(shù)量,藉以控制食欲及新陳代謝的速率。
瘦素透過抑制體內(nèi)神經(jīng)肽Y neuropeptide Y (NPY)刺鼠肽基因相關(guān)蛋白agouti-related peptide (AgRP)的活躍程度,從而使體內(nèi)另一種荷爾蒙黑色素細(xì)胞刺激激素alpha-melanocortin stimulating hormone (α-MSH)的活躍情度增強(qiáng)。
隨著2000年以來對(duì)瘦素探討的不斷深入,人們開始認(rèn)識(shí)到瘦素不僅由脂肪組織分泌,其它組織如乳腺上皮細(xì)胞、胎盤、胃黏膜上皮細(xì)胞也中可檢測(cè)到,其受體不僅存在于丘腦、脂肪組織,還廣泛存在于全身各個(gè)組織。瘦素與機(jī)體系統(tǒng)的病理生理關(guān)系正逐步被人們了解。

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蛋白質(zhì)印跡法是由瑞士*弗雷德里希生物研究所(Friedrich Miescher Institute)的Harry Towbin在1979年提出的。在尼爾·伯奈特(Neal Burnette)于1981年所著的《分析生物化學(xué)》(Analytical Biochemistry)中被稱為Western Blot。蛋白免疫印跡(Western Blot)是將電泳分離后的細(xì)胞或組織總蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特異性抗體檢測(cè)某特定抗原的一種蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于基因在蛋白水平的表達(dá)研究、抗體活性檢測(cè)和疾病早期診斷等多個(gè)方面。

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