λ噬菌體基因組DNA提取試劑盒(PEG沉淀法）這個(gè)操作不簡(jiǎn)單

 信帆生物供應(yīng)λ噬菌體基因組DNA提取試劑盒(PEG沉淀法），產(chǎn)品聽(tīng)說(shuō)不簡(jiǎn)單，我們來(lái)看看吧！

 產(chǎn)品資料：λ噬菌體基因組DNA提取試劑盒(PEG沉淀法)

產(chǎn)品規(guī)格：50T

 產(chǎn)品保存：4℃,避光,12個(gè)月

產(chǎn)品介紹：簡(jiǎn)便的λ噬菌體基因組DNA的試劑盒，其提取原理是通過(guò)PEG沉淀、酚異戊醇等提取，殘留碎片通過(guò)沉淀離心去除，通過(guò)一系列快速的漂洗、離心步驟，將鹽、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除

噬菌體是使用的克隆載體,其基因組是長(zhǎng)度約為50kb的雙鏈DNA分子,其在宿主細(xì)胞由兩種生活途徑:

1、裂解生長(zhǎng):環(huán)狀DNA分子在細(xì)胞內(nèi)多次復(fù)制,合成大量噬菌體基因產(chǎn)物,裝配成噬菌體顆粒,裂解宿主菌再進(jìn)行下一次感染;

2、溶源性生長(zhǎng):感染細(xì)胞內(nèi)λ噬菌體DNA整合到宿主菌染色體DNA中與之一起復(fù)制,并遺傳給子代細(xì)胞,宿主細(xì)胞不裂解?？瞥x人員常常利用λ噬菌體裂解生長(zhǎng)的特點(diǎn),培養(yǎng)獲取大量的λ噬菌體顆粒并提取λ菌體DNA。噬菌體載體廣泛用于文庫(kù)篩選,目的克隆培養(yǎng)獲得大量的噬菌體顆粒需要提取λ噬菌體DNA來(lái)開(kāi)展測(cè)序等后續(xù)工作。λ噬菌體裂解培養(yǎng)物離心后的上清,首先用 RNase a/ DNaseⅠ混合酶消化去除殘留的宿主菌 DNA/RNA,沉淀收集噬菌體,通過(guò)酚異戊醇等提取,殘留碎片通過(guò)沉淀離心去除,通過(guò)一系列快速的漂洗、離心的步驟,將鹽、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,獲得DNA的量很高,但是純度一般,但是足夠用于大多數(shù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

λ噬菌體基因組DNA提取試劑盒(PEG沉淀法)是簡(jiǎn)便的λ噬菌體基因組DNA的試劑盒,其提取原理是通過(guò)PEG沉淀、酚異戊醇等提取,殘留碎片通過(guò)沉淀離心去除,通過(guò)一系列快速的漂洗、離心步驟,將鹽、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,即可獲得入噬苗體基因組可進(jìn)行酶切、PCR等下游實(shí)驗(yàn)。僅用于科硏領(lǐng)域,不用于診斷或治療。

注意事項(xiàng)
1、用于裂解的噬菌體、宿主菌越新鮮,裂解越好、收獲量越大。
2、液體培養(yǎng)裂解時(shí),到了時(shí)間裂解還沒(méi)發(fā)生,可適當(dāng)?shù)奶岣邷囟然蚣哟笳駬u速度
3、 RNase/ DNase消化過(guò)度,可能減少產(chǎn)量;消化不*,可粘走部分噬菌體
4、噬菌體裂解液在低溫下易結(jié)皛析岀白色物質(zhì),可37℃溫浴至*溶解。

λ噬菌體基因組DNA提取試劑盒(PEG沉淀法）這個(gè)操作不簡(jiǎn)單