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信帆生物科技有限公司:TNF-a ELISA試劑盒產品介紹

點擊次數:1314     更新時間:2015-06-16

人TNF-α前體由233個氨基酸組成(26 kDa),其中包含由76個氨基酸殘基組成的信號肽,在TNF轉化酶TACE的作用下,切除信號肽,形成成熟的157個氨基酸殘基的TNF-α(17 kDa)。由于沒有蛋氨酸殘基,故不存在糖基化位點,其中第69位和101位兩個半胱氨酸形成分子內二硫鍵。人類 TNF-α與小鼠 TNF-α有79%氨基酸組成同源性,TNF-α的生物學作用似無明顯的種屬特異性。zui近有人報道通過基因工程技術表達了N端少2個氨基酸(Val、Arg)的155氨基酸人TNF-α,具有更好的生物學活性和抗腫瘤效應。此外,還有用基因工程方法,將TNF-α分子氨基端7個氨基酸殘基缺失,再將8Pro、9Ser和10Asp改為8Arg、9Lys和10Arg,或者再同時將157Leu改為157Phe,改構后的TNF-α比天然TNF體外殺傷L929細胞的活性增加1000倍左右,在體內腫瘤出血壞死效應也明顯增加。TNF-α和β發(fā)揮生物學效應的天然形式是同源的三聚體。

腫瘤壞死因子(TNF)是一種具有廣泛生物學活性的細胞因子,主要由激活的單核-巨噬細胞所分泌,參與機體的免疫調節(jié)與炎癥反應,也是某些感染性疾病和肝臟損傷的致病因素。正常人體液中的TNF水平一般在100pg/ml以下,當患有某些疾病時, TNF水平可有不同程度增高。因此,檢測患者體液中的TNF水平,具有一定的意義。

上海信帆科技有限公司試劑盒采用雙抗夾心酶聯免疫檢測法測定人血漿或血清中的TNF,用純化的人腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入腫瘤壞死因子α(TNF-α),再與HRP標記的腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腫瘤壞死因子α(TNF-α)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人腫瘤壞死因子α(TNF-α)濃度。 

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