過氧化物酶(POX)染液

(Peroxidase stain沃什伯恩(Washburn)法)

染色原理

粒細(xì)胞和單核細(xì)胞胞漿中含有過氧化酶，在有受體(如聯(lián)苯胺) 存在下，催化過氧化氫放出新生態(tài)氧，使聯(lián)苯胺氧化成聯(lián)苯胺藍(lán)，再與亞硝基氰-化鈉結(jié)合成穩(wěn)定的藍(lán)色顆粒定位于細(xì)胞漿中，否則聯(lián)苯胺藍(lán)可繼續(xù)脫氫，氧化為棕色的苯醒二胺。

儲存條件及有效期

本試劑盒應(yīng)置 4°C保存保存，有效期一年。試劑二應(yīng)用液一定要現(xiàn)用現(xiàn)配，稀釋后的應(yīng)用液只能保持 2~3 小時。

染色步驟

1、新鮮血片或骨髓片，滴加試劑一染液 5~8 滴 ，不要洗。

2、1~2min 后再滴加試劑二稀釋后的應(yīng)用液 5~8 滴，混勻，放置 4~8min，清水洗。

3、加試劑三 5~8 滴，使覆蓋整個血膜，停 30 秒~1 分鐘

4、滴加試劑四 5~8 滴，與試劑三混勻，染色 8~10 分鐘

5、用清水沖洗，將血片直立晾干，也可用濾紙慢慢吸干。

染色結(jié)果

1、 陽性反應(yīng)強(qiáng)度的判斷:

陰性    無顆粒。

弱陽性  顆粒小，分布稀疏。

陽性    顆粒略粗，分布較密集。

強(qiáng)陽性  顆粒粗大，呈藍(lán)黑色，充滿胞漿。

2、粒細(xì)胞系統(tǒng):

早期原粒細(xì)胞陰性，晚期原粒細(xì)胞及以下階段細(xì)胞均含不同程度的藍(lán)黑色、圓形、邊緣不整齊、大小不一致的陽性顆粒，隨粒細(xì)胞的成熟而增多，直至充滿細(xì)胞漿，嗜酸性粒細(xì)胞顆粒更粗大，呈深藍(lán)色。嗜堿性粒細(xì)胞正常多為陰性。在病理狀態(tài)下有時成熟中性粒細(xì)胞可呈陰性。

3、單核細(xì)胞系統(tǒng):

性或弱陽性有少數(shù)籃色顆粒，較小。，形態(tài)不規(guī)則，彌散分布，可覆蓋核上。

4、網(wǎng)狀細(xì)胞及吞噬細(xì)胞

網(wǎng)狀細(xì)胞及吞噬細(xì)胞有不同程度的陽性顆粒。

5、淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、紅細(xì)胞及巨核細(xì)胞系統(tǒng):

淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、紅細(xì)胞及巨核細(xì)胞等均陰性。

過氧化物酶(POX)染液