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更新時(shí)間:2025-02-09
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土壤硝酸還原酶(NR)實(shí)驗(yàn)代測(cè)
硝酸還原酶是一種氧化還原酶,可催化硝酸離子還原成亞硝酸離子的反應(yīng)。
硝酸還原酶位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)或細(xì)胞膜外,在硝酸鹽還原途徑中是限速因子,通過 NADH和 NADPH 其中之一或兩者( 雙功能) 提供兩個(gè)電子催化反應(yīng),使硝酸鹽轉(zhuǎn)換成亞硝酸鹽。
結(jié)構(gòu):
真核生物中已發(fā)現(xiàn)三種硝酸還原酶,高等植物中常見的一種是NADH-specific硝酸還原酶(EC1.6.6.1)。在少數(shù)幾種植物中發(fā)現(xiàn)了第二種,即NAD(P)H-bispecific硝酸還原酶(EC1.6.6.2),它在歐洲白樺中以同源異構(gòu)體式存在,在大豆和單子葉植物(玉米、水稻和大麥等)中以第二種同源異構(gòu)體形式和NADH-specific硝酸還原酶一起存在。第三種形式為NADPH-specific(EC1.6.6.3),存在于真菌和苔蘚中。
硝酸還原酶是同源二聚體,每個(gè)亞基分子質(zhì)量約100~110kDa,包含三個(gè)功能區(qū),從N-末端到C-末端分別是:鉬輔酶MoCo(硝酸鹽結(jié)合與降解區(qū)域),血紅素-Fe(細(xì)胞色素b5結(jié)合域)和FAD(黃素腺苷酸二核苷酸磷酸、細(xì)胞色素b還原酶、NADH或NADPH結(jié)合域)。這三個(gè)區(qū)域是氧化還原中心,催化電子從NADP或NADPH轉(zhuǎn)移到硝酸鹽上。這三個(gè)結(jié)構(gòu)和功能域通過hingeⅠ和hingeⅡ兩個(gè)鉸鏈連接起來(lái)。植物體內(nèi),hingeⅠ連接細(xì)胞色素b5結(jié)合域和鉬輔酶/二聚化區(qū)域,它包含一個(gè)保守的磷酸化絲氨酸殘基,被具有調(diào)控作用的14-3-3二聚體識(shí)別,在植物、真菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中這個(gè)二聚體來(lái)自一個(gè)高度保守的基因家族。在二價(jià)陽(yáng)離子存在的情況下,hingeⅠ把硝酸還原酶轉(zhuǎn)換成*無(wú)活性的復(fù)合體,使之不能行使從NADPH到硝酸鹽之間的電子轉(zhuǎn)移,從而抑制酶的活性。
土壤硝酸還原酶(NR)實(shí)驗(yàn)代測(cè)