H+K+ -ATP 酶活力測試盒

二、樣本前處理

準確稱取胃粘膜組織重量，按重量（g）:體積（mL）=1:9

的比例，加入 9 倍體積的生理鹽水，冰水浴條件下制備成 10%

的組織勻漿液，2500 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取上清液，再用生

理鹽水 5 倍稀釋成 2%的濃度待測。

六、測試原理：

ATP 酶可分解 ATP 生成 ADP 及無機磷，測定無機磷

的量可判斷 ATP 酶活力的高低。H ＋K ＋ -ATP 酶是一種能被

鉀專一激活而不被烏本苷抑制的 ATP 酶。

七、注意事項：

1、具有微量、靈敏、快速的特點。所以對測定所用試管要

求嚴格，要沒有一點磷，若試管放過磷酸或磷酸緩沖液，

一定要洗得非常干凈，即先用洗潔精加水煮，再用自來

水沖，最后用雙蒸水沖干凈。用一次性塑料管或新

玻璃管，避免磷污染是檢測成敗的關(guān)鍵。

2、定磷劑配好后，不可放置太久，一般保存 1～5 天，

現(xiàn)用現(xiàn)配。隨時放冰箱。

3、采用先配 A、B 兩種混合液，然后按簡化操作步驟

檢測。這樣快捷、準確。

4、所有配試劑的器皿均要專用，包括吸硫酸的吸管及盛水

的器皿。

八、測定意義：

H ＋K ＋ -ATPase 對胃酸的分泌及胃的消化功能具有重要

的生理意義，70 年代 Forte 等人首先在牛蛙的胃粘膜上分

離出一類能被 K ＋專一激活而不被烏本苷抑制的 ATPase 即

H ＋K ＋ -ATPase，隨后 Lee·j 等人又證明了含有該酶的膜囊泡

運動跨膜運輸質(zhì)子的作用，從而為胃酸分泌的機理奠定了

分子學基礎(chǔ)，H ＋K ＋ -ATPase 定位于胃粘膜壁細胞（Parietal

lell）上，屬于第二類質(zhì)子泵，它通過自身的磷酸化（E1→E2）

與去磷酸化（E2→E1）完成的 H ＋ /K ＋電中性（electroneutral）

跨膜離子轉(zhuǎn)運，不斷將壁細胞內(nèi)的質(zhì)子運輸?shù)侥ね庑惺姑?/span>

酸的功能。

H+K+ -ATP 酶活力測試盒